雞卵泡顆粒細胞分離自PMSG誘導后3天的雞卵巢組織,顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。細胞形狀呈圓形或橢圓形。細胞采用機械分離法制備而來,細胞總量約為5×105個/瓶,細胞純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。初級卵泡的顆粒細胞為單層;次級卵泡的顆粒細胞增至復層;成熟卵泡的顆粒細胞展開又變為單層。顆粒細胞的胞核大而圓,著色深,細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。
雞卵泡顆粒細胞分離自雞卵泡組織;成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明顯。卵泡內膜細胞緊靠卵泡顆粒層,與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔,內膜細胞呈多邊形,胞質清亮,胞核圓形,細胞間可見許多毛細血管,外膜細胞位于較外層,多呈梭形,與周圍結締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞,在卵泡開始發育、卵細胞成長的同時,周圍的菱形細胞變為立方形,并由單層增生成復層,因其細胞漿內含有顆粒,故稱為顆粒細胞。
雞卵泡顆粒細胞培養基于4℃條件下可保存3-6個月。在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。